| 22. Spieltag | 27.02.2010 | 1. FC Saarbrücken | - | Sportfreunde Lotte | 1:0 | ||||
| 24. Spieltag | 13.03.2010 | Fortuna Düsseldorf II | - | Sportfreunde Lotte | 0:2 | ||||
| 25. Spieltag | 20.03.2010 | Sportfreunde Lotte | - | Bonner SC | 1:2 |  |
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| 20. Spieltag | 23.03.2010 | 1. FC Kaiserslautern II | - | Sportfreunde Lotte | 1:2 | ||||
| 26. Spieltag | 27.03.2010 | 1. FC Köln II | - | Sportfreunde Lotte | 1:1 | ||||
| 21. Spieltag | 30.03.2010 | Sportfreunde Lotte | - | FC Schalke 04 II | 0:1 | ||||
| 31. Spieltag | 29.04.2010 | Sportfreunde Lotte | - | Preußen Münster | 1:1 | |
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| 32. Spieltag | 07.05.2010 | Sportfreunde Lotte | - | Bayer Leverkusen II | 2:2 | ||||
| 33. Spieltag | 22.05.2010 | Bor. Mönchengladbach II | - | Sportfreunde Lotte | 0:1 | ||||
| 34. Spieltag | 29.05.2010 | Sportfreunde Lotte | - | Waldhof Mannheim | 2:0 |
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